Dados da dissertação de mestrado

Autor: Ronaldo Leal Carneiro.

Título: Otimização de cultivo de Microcystis aeruginosa Kütz Emend. Elekin e Cylindrospermopsis raciborskii (Woloszynska) Seenaya & Subba Raju (cianobacteria) para produção de padrões de microcistina-LR e cilindrospermopsina. 

Ano: 2005.      Texto completo em PDF

Resumo:

As cianotoxinas microcistina-LR e cilindrospermopsina são hepatotoxinas produzidas por cianobactérias e já foram relacionadas com casos de intoxicação animal e humana. O Ministério da Saúde do Brasil adota como limite máximo aceitável (VMA) de microcistinas em água para consumo humano o valor de 1 μg/L e recomenda a análise de cilidrospermopsina cuja VMA é de 15 μg/L para (Funasa, 2004), obrigando os responsáveis pelo abastecimento público monitorar a presença de cianotoxinas em mananciais de abastecimento. Este estudo procurou colaborar com o estabelecimento de condições otimizadas para a produção destas cianotoxinas purificadas, visando permitir a exeqüibilidade da produção nacional de padrões de microcistina-LR e cilindrospermopsina, para auxiliar no controle da qualidade da água. Foram estudadas as variações na síntese de microcistina-LR, por uma cepa de Microcystis aeruginosa (NPJB-1) e na síntese de cilindrospermopsina, em uma cepa de Cylindrospermopsis raciborskii (CYP 011K) em culturas submetidas a diferentes regimes de irradiância. Para acompanhar o estado fisiológico das cepas foram avaliados o crescimento celular, através da contagem de células e a concentração de clorofila a, com extração em metanol 100%, conteúdo intracelular de carboidratos e excreção de carboidratos (carboidratos extracelulares), pelo método fenol ácido sulfúrico. A produção destas toxinas nas diferentes condições de cultivo foi avaliada na fase exponencial e estacionária de crescimento, por técnicas específicas de HPLC, com a detecção para ambas toxinas sendo feitas em UV e com o auxílio de um fotodetector de arranjo de diiodo. As maiores taxas de crescimento e maior síntese de microcistina-LR, em 10⁶ células da cepa NPJB-1 (M.aeruginosa), foram encontradas nas culturas mantidas sob a intensidade luminosa de 100 μmoles fótons.m^-2.s^-1. A idade da cultura influenciou na concentração de microcistina-LR por células. O conteúdo foi maior na fase exponencial de crescimento e diminuiu na fase estacionária sendo observada uma relação direta entre a síntese de clorofila a e a produção de microcistina-LR por esta vi  .s. Houve uma tendência a diminuição do comprimento dos tricomas de C. raciborskii ao final da fase exponencial de crescimento, nas culturas submetidas à maiores intensidades luminosas (60 e 100 μmoles fótons.m.s). A maior produção de cilindrospermopsina em 10células de C. raciborskii ocorreu nas culturas submetidas a 40 μmoles fótons.m.scepa. De acordo com os dados obtidos, as condições mais propícias de cultivo da cepa NPJB-1 para produção de padrões de microcistina-LR são 100 μmoles fótons.m^-2.s^-1, com cinco dias de cultivo. As maiores taxas de crescimento da cepa CYP 011K (C. raciborskii), foram encontradas nas culturas mantidas sob a intensidade luminosa de 100 μmoles fótons.m^{-2-1-2-16 -2-1}, tanto no meio da fase exponencial de crescimento, quanto ao final dos cultivos. As condições mais propícias de cultivo da cepa CYP 011K de C. raciborskii para produção de padrões de cilindrospermopsina são 40 μmoles fótons.m^-2.s^-1, com doze dias de cultivo

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